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단일 실험에서 최대 30개의 immune marker 측정


BD® AbSeq Immune Discovery Panel (IDP)은 항체 올리고 기반 기술을 사용하여 개발되었으며, single tube에서 동결 건조된 대부분의 주요human immune markers 대한 30 가지 specificity로 구성됩니다. BD® AbSeq IDP는 human immune marker를 측정하기 위해 테스트 되었고, BD Rhapsody™ Single-Cell Analysis System 에서 BD Rhapsody™ Single-Cell RNA Assays 및 BD® Multiplexing Kits와 함께 사용하도록 설계되었습니다.

BD® AbSeq Immune Discovery Panel brochure 에서 상세한 내용을 확인해보세요.

 

performance1

BD® AbSeq IDP Specificities 목록

30 pre-titrated antibodies

 
SpecificityCloneOligo ID
CD3UCHT1
AHS0231
CD4SK3AHS0032
CD8SK1AHS0228
CD11c
B-Ly6
AHS0056
CD14
MPHIP9
AHS0037
CD16
3G8AHS0053
CD19
SJ25C1
AHS0030
CD25
2A3
AHS0026
CD27M-T271AHS0025
CD28L293AHS0138
 
SpecificityCloneOligo ID
CD45RA
HI100
AHS0009
CD56
NCAM16
AHS0019
CD62L
DREG-56
AHS0049
CD127
HIL-7R-M21
AHS0028
CD134
ACT35
AHS0013
CD137
4B4-1
AHS0003
CD161
HP-3G10
AHS0205
CD183 (CXCR3)
1C6/CXCR3
AHS0031
CD185 (CXCR5)RF8B2AHS0039
CD186 (CXCR6)13B 1E5AHS0148
 
SpecificityCloneOligo ID
CD196 (CCR6)11A9AHS0034
CD197 (CCR7)2-L1-AAHS0273
CD272J168-540
AHS0052
CD278DX29
AHS0012
CD279EH12.1AHS0014
CD357 (GITR)V27-580
AHS0104
CD366 (TIM-3)7D3
AHS0016
HLA-DRG46-6
AHS0035
IgDIA6-2AHS0058
IdMG20-127AHS0198

BD®AbSeq IDP 프로토콜


BD® AbSeq IDP 사용을 위해서는 다음 단계를 준수해주십시오.  


동결건조된 IDP를 재구성하고 cell을 staining하는 단계  

 

  1. 호일 백에서 IDP를 제거하고 5분 동안 실온에 둡니다.
  2. Pallet이 튜브 바닥에 있는지 확인하십시오.
  3. 튜브 바닥으로 뉴클라아제가 없는 물 35 µL를 추가하고, 5분 동안 실온에서 항체가 재구성되도록 합니다.
  4. 세포 staining 준비가 될때까지 재구성 항체를 얼음에 보관합니다.
    주석: 재구성 항체는 24시간 이내에 사용해야 합니다.
  5. 2X AbSeq labeling master mix를 만들기 위해  BD Pharmingen™ Stain Buffer 65 µL 를 솔루션에 추가하여 총100 µL이 되도록 합니다.
  6. BD® AbSeq Ab-Oligos (Doc ID 214394 Rev. 1.0)로 Single Cell Labeling 후 준비된 cell suspension 100 µL와 혼합하고 30분 동안 얼음 위에서 cell을 staining 합니다.
  7. BD Pharmingen™ Stain Buffer (FBS) 3 mL 를  labeled cell과 pipette mix에 추가합니다.
  8. 400 x g 에서 각 튜브를 5분 동안 원심분리 합니다.
  9. 각 튜브의 뚜껑을 열고 상청액을 감염성 폐기물에 붓습니다. 튜브를 거꾸로 한 다음 튜브 가장자리에서 잔류 상청액을 제거하기 위해 보푸라기가 없는 수건으로 가볍게 닦아냅니다.
  10.  7~9번 단계를 두번 더 반복하여 총 3회 세척합니다.
  11. BD Rhapsody™ Cartridge Reagent Kit의 620 µL cold BD Pharmingen™ Stain Buffer (FBS)에서 pellet을 resuspend하고, single-cell capture를 진행합니다.

 BD Rhapsody™ Systems (Doc ID: 220524)을 이용한 Single Cell Analysis Workflow를 참조하십시오.

성능

리소스
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